首先，样品制备阶段是将待分析的混合物溶解或悬浮于适当的溶剂中，并通过过滤或离心等方法去除杂质。接下来，需要准备色谱板，这包括选择合适的基质和选择性的涂层材料。
在样品施加阶段，使用微量注射器将样品施加在色谱板的起点上，通常通过点斑法或线斑法进行。然后，色谱板被放置在封闭的容器中，以便让溶剂上升并分离样品。
在色谱板开发阶段，容器中的溶剂会通过毛细作用上升到色谱板上。不同的化合物由于其与涂层材料的亲疏性不同，会在色谱板上上升的速度不同，从而实现分离。一旦样品达到所需的上升距离，色谱板被取出并干燥。
接下来是检测和数据分析阶段，可以使用紫外可见光谱法、荧光法、显色剂等方法对分离后的化合物进行定性和定量分析。最后，根据测定结果进行数据分析和结果的解释。