猪星状病毒ORF2基因的克隆及序列分析

饲养管理　中国畜牧兽医文摘２０１３年２９卷第９期　提　高山　羊养殖经济效益的措施　陶圳’　彭丹　（重庆市彭水县畜牧兽医局，重庆４０９６００）　山羊具有多产、早熟、瘦肉率高等特点，其肉、奶、皮毛等　进肠胃的发育生长，强化羔羊体质。在羔羊生长到３～４个月的时　都有着较高的经济价值。以皮毛为例，山羊毛是制作工业用刷、　间可以断奶，断奶后基本可以放养在牧场上，并适时地配合精饲　毛笔等的上等佳品，有着极高的经济价值。据统计，我国每年产　料的喂养。对于种公羊，可以依据放养及配种的实际隋况，配合　出的山羊板皮在４　０００多万张，出口占了１　０００多万张以上，占据着　一定量的粗饲料和适量的精饲料进行喂养。每头种公羊全年应贮　对外国际贸易的２５％左右，在国际市场上有着较高的声誉。　备粗饲科１５０　ｇ左右，精饲料５Ｏ　ｋｇ左右。对于母羊的饲养，可不　１　品种选择　用进行补饲喂养，但是在枯草时期，应该适时补料，以便母羊安　从重庆本地山羊品种来看，其生长较为缓慢、个头不大、屠　全过冬。成年母羊每头全年应贮备粗饲料１２０　ｋｇ左右，精饲料２０　宰率不是很高、质量也参差不齐，其经济收益不是很高。为了提　ｋ　左右。其次，科学的山羊管理，羊舍要保证采光充足、干燥通　高饲养山羊的经济收益，提供更多的优质山羊产品，必须进行品　风、夏季凉爽、冬无贼风。具体面积根据饲养羊群品种、年龄而　种改良。　定。此外，为了防止各种寄生虫，每年的春秋两季要进行必要的　在品种改良中，应该根据本地的实际条件和国内外的市场　预防性药浴。药浴要在专门的药浴池内进行，选择温暖的天气进　需求来进行。建议本地区山羊改良向皮肉兼用方向发展。至于　行，水温保持在３０℃为宜，时间控制在１　ｍｉｎ左右。农家养殖，如　具体改良方案，建议首先引进体型大、泌乳量高的关中奶山羊　果养殖数量有限，可以考虑进行缸浴或桶浴。常用的药液有石硫　或崂山奶山羊为父本，与本地母羊杂交，选出符合理想型的杂１　合剂或０．５％敌百虫水剂。采用石硫合剂可用生石灰１５　ｋｇ、硫磺粉　代母羊，再与南江黄羊、波尔山羊等肉用山羊为父本进行三元　２５　，用水拌成糊状后加水３００　ｋｇ煮沸，取上清液加入温水１　０００　杂交。然后，在２～３代杂种羊中选出一定数量的优秀公羊与理　即可；配制０．５％敌百虫水剂，则用敌百虫１　ｋｇ，加温水２００　ｋｇ，　想型母羊进行自群繁育，以获得遗传性比较稳定的生产性能较高　持充分溶解后即可。药浴之前要做好羊只的补水工作，避免羊群　的羊群。　因口渴而误食药液。此外，对于杂种的公羊，一定要去势，时间　为保证能够获得较好的改良效果，首先，要做好杂交亲本　选在在羔羊出生后的３周左右进行。这样可以保证公羊性情温顺、　的选择，基础母羊群要以本地山羊中较为优秀的个体组成，而父　专心育肥，提高生产效益。　本则以品种纯、体型大、生长快、头大颈粗、四肢端正的羊种为　３适度规模地经营　最佳，同时注意其睾丸发育良好，大小较为适中，性欲旺盛。其　就重庆地理风貌来看，其山区和半山区较多，人均耕地面积　次，要做好杂交后代的选留工作。选择的培育后代，应该体型结　有限，剩余大量的劳动力，粮食储备又不是非常的丰裕，进行其　实均匀、四肢健硕。公羊睾丸大而均匀、母羊的乳房大而柔软。　他家禽的养殖难度较大，但是如果发展山羊生产却有得天独厚的　在体重要求上，杂ｌ代母羊周岁体重要保证在２Ｏ　以上，三元杂　草地条件，潜力很大，如果能适度规模经营，从事商品性生产，　种后代的周岁体重则要保证在２５　ｋｇ以上，这样品种才算是优良。　经济效益还是比较可观的。一般来说，在山区或者是半山区，草　２饲养管理　地资源较为宽广，可考虑１人放牧；而对于丘陵地带，地域狭小，　首先，从饲养角度来看，坚持放牧后的补饲是山羊养殖的最　且有农作物地经过，可考虑２人，甚至多人放牧。同时，根据本地　经济有效的饲养方式，这种养殖方式适用于羔羊、青年羊培育阶　实际情况，重庆山区、半山区及丘陵地带，可考虑年养殖２０～３０　段和种公羊的饲养。对于哺乳期间的羔羊，除了补充足够的初乳　头繁殖母羊，年饲养量在１５０头比较适宜。从调查情况看，一般调　和常乳之外，半个月左右的时间要训练羔羊进行鲜嫩青草或细软　养７个多月，体重在２０　ｋｇ左右时进行市场兜售，养殖生产经济效　的优质干草地自行采食训练，并结合着补饲进行，可以有效地促　益较为可观。　猪星状病毒ＯＲＦ２基因的克隆及序列分析／兰家暖，刘磊，郭　基于ＶＰ１重组蛋白的口蹄疫病毒０型间接ＥＬ　ｌ　ＳＡ检测技　旋…（广西大学动物科学技术学院，南宁５３０００５）／／中　术／于军超（青岛农业大学动物科技学院，山东青岛　国兽医杂志．－２０１２，４８（１２）．－２７～３１，９７　２６６１０９），张乐萃，高志强…／／中国兽医杂志．－２０１２，４８　参考ＧｅｎＢａｎｋ上发表的猪星状病毒亚基因组序列，设计１对引　（１２）．－２０～２３　物，对猪星状病毒广西流行株衣壳蛋白ＯＲＦ２基因进行扩增，最终　采用ＲＴ—ＰＣＲ方法扩增０型口蹄疫病毒ＶＰ１基因片段，将其克隆　克隆得到ＰＡｓｔＶ／ＮＮＪＧ７株的衣壳蛋白完整序列。序列分析发现，其　于ｐＥＴ一３２ａ。将重组质粒转化宿主菌Ｒｏｓｅｔｔａ，经１．Ｏｍｍｏｌ／Ｌ　ＩＰＴＧ　ＯＲＦ２全长２　３５８ｂｐ，编码７８６个氨基酸；与猪星状病毒Ｉ型参考株　诱导，外源基因获高效表达。通过Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ以及ＥＬＩＳＡ试验　核苷酸同源性最高，为７７．３％￣７９．４％；在ＯＲＦｌｂ和ＯＲＦ２连接处有一　证明，重组ＶＰ１蛋白与标准阳性血清发生反应。以纯化的ＶＰ１蛋白　段高度保守的序列，在ＯＲＦ２　３　端有一段长８３ｂｐ￣翻译序列及一　作为检测抗原包被酶标板建立了检测口蹄疫病毒０型抗体的间接　个含４３ｂｐ高度保守的茎环样基序。本试验不仅丰富了猪星状病毒　ＥＬＩＳＡ方法。对３５５份临床血清样品的检测结果显示，建立的方法　衣壳蛋白基因序列，也为基因疫苗和诊断试剂盒的研制提供材料　与口蹄疫病毒０型液相阻断试剂盒符合率为９８．８７％。表明建立的方　及理论依据。　法能够用于口蹄疫病毒０型抗体的快速分型检测。　・６０・